-
技術(shù)文章ARTICLE
從海膽和沙幣等無(wú)脊椎動(dòng)物系統(tǒng)獲取配子的實(shí)驗(yàn)方法
發(fā)布時(shí)間： 2021-11-16 點(diǎn)擊次數(shù)： 947次材料與儀器
海膽和沙幣
KCl 溶液 3-氨基-1 2 4-三唑
巴斯德吸管 Nytex 濾器步驟
一、海膽和沙幣體腔內(nèi)注射 0.5 mol/L 的 KCl
1. 制備 0.5 mol/L 的 KCl 溶液。
2. 用海水沖洗一下動(dòng)物以去掉顆粒物質(zhì)。
3. 用一個(gè) 23~26 號(hào)的針頭向動(dòng)物的口緣空腔內(nèi)注射多達(dá) 500 μl 或 100 μl KCl。
4. 用巴斯德吸管收集“干"（米青）子，并儲(chǔ)存于置于冰上的小塑料管中?！?br style="border: 0px solid; box-sizing: border-box; --tw-shadow:0 0 #0000; max-width: 100%; background-image: none !important; background-position: initial !important; background-size: initial !important; background-repeat: initial !important; background-attachment: initial !important; background-origin: initial !important; background-clip: initial !important; color: rgb(77, 88, 101) !important; font-size: 0.32rem !important; line-height: 0.48rem !important; margin: 0px !important;"/>
5. 將雌性動(dòng)物在一杯海水中翻過(guò)來(lái)收集卵子。
6. 用 Nytex 濾器洗卵子，以去掉顆粒，并使卵子吸附到濾膜上。
7. 通過(guò)將水吸走或小心倒掉，再加入潔凈的海水將卵子洗幾遍。
二、海膽的電刺激
1. 將海膽反口面向上放在紙巾上。
2. 將兩個(gè)電極一邊一個(gè)放在接近生殖管的貝殼部位，配子就會(huì)從生殖孔中釋放出來(lái)。
3. 如果需要，在生殖管周圍的幾個(gè)部位通以電流。
4. 開(kāi)始收集卵子和（米青）子，并受精。
三、海膽和沙幣卵的受精
1. 制備稀釋的（米青）子懸液。
2. 向洗過(guò)的卵中加入（米青）子。
四、受精膜的去除
1. 獲取卵子。
2. 將卵子重懸于含有 1mmol/L 3-氨基-1,2,4-三唑的海水中。
3. 受精。
4. 當(dāng)受精膜出現(xiàn)后，將卵子倒入直徑比卵子小幾微米的 Nytex 網(wǎng)中。
-
血清系列
-
細(xì)胞轉(zhuǎn)染
-
支原體清除
-
細(xì)胞凍存
-
實(shí)驗(yàn)耗材
-
分子試劑
-
細(xì)胞增殖與凋亡
-
Biozellen系列
-
培養(yǎng)基
-
ELISA試劑盒
-
TOYOBO（東洋紡）
-
ZYMO RESEARCH
-
Greiner（格瑞納）
-
IKA（艾卡）
-
化學(xué)發(fā)光底物（ECL）
-
PROSPEC系列
-
Epigentek系列
-
微生物檢測(cè)
-
細(xì)胞生物學(xué)
-
Corning康寧
-
解離試劑
-
細(xì)胞類-實(shí)驗(yàn)耗材
-
原代細(xì)胞
-
植物檢測(cè)系列試劑盒
-
SERANA
-
細(xì)胞系
-
生化試劑盒
-
環(huán)境檢測(cè)系列試劑盒（AKEN）
-
類器官培養(yǎng)
-
緩沖器和解決方案
-
生物三凝膠基質(zhì)
-
細(xì)胞因子分子
-
生物樣本庫(kù)
